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實驗室里的“水”,你了解多少?
2024-05-07昀冠科學商城新聞編輯
水,千變萬化
實驗室的“水”,更是充滿變化
關于它的知識,您都了解嗎?
一起來看!
1.水的基本知識
1個水分子(H2O)是由1個氧原子和2個氫原子彎曲鍵結而成。由于正、負電荷的中心不一致,因此屬于極性分子。當2個水分子同時存在時,二者會由靜電交互作用與氫鍵結合,互相吸引并保持一定的距離。而1個水分子可以同時與4個水分子結合,形成晶體般的整齊結構。
水分子聚合體中,由于氫鍵鍵結的網狀結構會部分斷裂,而形成逐次移動變化的狀態,因此水在整體上呈現液態,而此結構變化每秒可達1012次。
一般而言,水若含有適量的鈉、鉀離子及硅酸鹽等礦物質,就會覺得好喝,若含有大量殘留的鹽類,如鎂、鈣等非酸堿中性鹽類,就會覺得難喝。也就是說,所謂的水除了H2O外,還含有許多其它的成分,而這些成分的種類和含量決定了水的味道。
水極易溶解鹽類,即使陰陽離子經由靜電的交互作用,很強的結合在一起,在水中也很容易電解。這是因為,水分子可以和離子結合產生“水合離子”。離子的半徑很小,電荷大的離子會與水分子強力的交互作用,由水分子在離子的周圍緊密排列。這時候,陽離子會與帶負極矩的氧原子相互作用,而陰離子則形成相反的結構。
2.水中存在的雜質
可溶性無機物:無機鹽類、溶解氣體、重金屬、硬度成分(鈣、鎂等);
可溶性有機物:木質素、單寧、腐植酸、內毒素、RNA分解酶、農藥、三氯甲烷、環境荷爾蒙物質、界面活性劑、有機溶劑;
微粒子:鐵銹、膠體、懸浮物、固體顆粒;
微生物:細菌類、藻類。
3.實驗用水所要求的純度
所謂實驗,是指對現象所推測的假設加以驗證的動作。假設能否被證明為真理,與假設能否具有再現性的結果至關重要。實驗的再現性除了要有良好的技巧,還受到所用化學試劑的純度和分析儀器的精密度的影響。實驗中用來配置溶液的化學試劑,及所使用的水的純度也非常重要。假設水中污染物對實驗檢測會造成影響,就必須去除這些物質。此外,為了取得良好的再現性結果,使用能保持穩定水質的純水是必要的。
隨著實驗用的分析系統靈敏度的提高,對水的純度有了更高的要求。
1ppm=1mg/L
1ppb=1μg/L
1ppt=1ng/L=1μg/ml
在水中,將距離25px的兩片表面積為25px2大小的電極加以通電,來監測兩極間的導電率,通過所加電壓和測得的電流能夠獲知兩極間的電阻值,這個數值在水質分析中通常被稱為電阻率或比電阻,其單位用MΩNaN(megaohm-centimeter)來表示。
電阻率的倒數稱為導電率或電導率,用μs/cm(micro Siemens per centimeter)來表示。
這兩個參數是表示水的純度的最常用參數。
將自來水中的離子去除,會使得電阻率值升高(導電率降低),單并非無限制的增加,這是因為部分水分子會電離為氫離子和氫氧根離子,其電阻率值極限值18.248MΩNaN(25℃)。此外,電阻率值會隨著水的電離常數而改變,因而會受到水溫的影響。例如,25℃的超純水,其電阻值為18.2MΩNaN,但在0℃則為84.2MΩNaN,100℃則為1.3MΩNaN。在25℃附近,當溫度上升1 ℃,其電阻值將下降0.84MΩNaN。因此,多使用補償至25℃的電阻率值來做衡量標準。
此外像總有機碳含量(TOC),熱源內毒素含量,細菌含量,顆粒含量,微生物含量,總溶解固體含量(TDS)等也常常被用作補充說明水質的重要參數。因此,水的純度標準通常由以上這些參數的一項或幾項來綜合說明、分級。
4.純水的分級標準
實驗室純水可分為4個常規等級:
純水、去離子水、實驗室Ⅱ級純水和超純水。
純水:純化水平最低,通常電導率在1-50μs/cm之間。它可經由單一弱堿性陰離子交換樹脂、反滲透或單次蒸餾制成。典型的應用包括玻璃器皿的清洗、高壓滅菌器、恒溫恒濕實驗箱和清洗機用水。
去離子水:電導率通常在1.0-0.1μs/cm之間。通過采用含強陰離子交換樹脂的混床離子交換制成,但它有相對較高的有機物和細菌污染水平,能滿足多種需求,如清洗、制備分析標準樣、制備試劑和稀釋樣品等。
實驗室Ⅱ級純水:電導率<1.0μs/cm,總有機碳(TOC)含量小于50ppb以及細菌含量低于1CFU/ml。其水質可適用于多種需求,從試劑制備和溶液稀釋,到為細胞培養配備營養液和微生物研究。這種純水可雙蒸而成,或整合RO和離子交換/EDI多種技術制成,也可以再結合吸附介質和UV燈。
超純水:這種級別的純水在電阻率、有機物含量、顆粒和細菌含量方面接近理論上的純度極限,通過離子交換、RO膜或蒸餾手段預純化,再經過核子級離子交換精純化得到超純水。通常超純水的電阻率可達18.2MΩ-cm,TOC<10ppb,濾除0.1μm甚至更小的顆粒,細菌含量低于1CFU/ml。超純水適合多種精密分析實驗的需求,如高效液相色譜(HPLC),離子色譜(IC)和離子捕獲-質譜(ICP-MS)。少熱源超純水適用于像真核細胞培養等生物應用,超濾技術通常用于去除大分子生物活性物質,如熱源(結果為<0.005IU/ml)以及無法檢測到的核酸酶和蛋白酶。
目前世界上比較通用的純水標準主要有以下幾個:國際標準化組織(ISO),美國臨床病理學會(CAP)試藥級用水標準,美國測試和材料實驗社團組織(ASTM),臨床試驗標準國際委員會(NCCLS),美國藥學會(USP)等。
同時,我國也有相應的純水標準:中國國家電子級超純水規格GB/T11446-1997和中國國家實驗室用水規格GB6682-92等。因此市面上絕大多數的純水系統,無論是進口的還是國產的,都是依據這些標準來設計流程的。
中國國家電子級超純水規格:GB/T11446.1-1997
5.純水的應用
目前純水主要應用在兩大領域:
一、生命科學應用領域
二、分析和常規應用領域
生命科學應用方面,主要有:細菌細胞培養,臨床生物化學,電泳,電生理學,酶聯免疫吸附分析,內毒素分析,組織學,水栽培,細胞免疫化學,哺乳動物細胞培養,介質制備,微生物分析,分子生物學,單克隆抗體研究,植物組織培養,放射性免疫分析等等。
分析和常規應用方面,主要有:蒸餾水器供水,蒸汽發生器,玻璃器皿清洗,樣本稀釋和試劑制備,超純水系統供水,固相萃取,普通化學,電化學,分光光度計,TOC分析,水質分析,離子色譜,火焰法原子吸收(Flame-AAS),石墨爐原子吸收(GF-AAS),高效液相色譜(HPLC),液質聯用(HPLC-MS),電耦合等離子光譜儀(ICP-AES),等離子質譜(ICP-MS),痕量金屬檢測,氣質聯用(GC-MS)等等。
6.超純水保持最佳水質的方法
超純水取水后很容易遭到環境污染,所以使用前取水(即取即用)方式時最合適的。只有把超純水與環境接觸的時間縮到極短,才能夠獲得純度極高的超純水。
在配置高純度的化學試劑時,盡量不要使用長時間儲桶中存放的超純水,因為儲桶經長時間使用后,會因雜質、微生物的污染而造成水質的劣化,像這種水,在使用時已經不再是超純水。
純水儲桶最好安裝空氣過濾器,防止環境因素造成的污染。
儲水桶請勿放置在日光直射處,水溫上升,容易造成微生物繁殖。特別是半透明儲水桶,也會因為日光通透而造成藻類繁殖。
超純水取水時一定要將初期的出水放掉,以獲得穩定的水質。
取水時讓超純水順著容器側壁流入,盡量不要讓氣泡產生,可降低空氣污染。
請不要在終端濾器后再連接軟管,使用直接取水的方式才能獲得純度高的超純水。
長時間不用純水時,應將壓力儲水桶中的RO水全部放掉以防止污染。
超純水機若長時間不使用,再次使用時應把初期純水充分放掉以確保水質。
原則上,純水機應至少每7—10天通水一次,以防止微生物污染。
超純水使用要點:
(1).即取即用
(2).排掉前端初期水
(3).取水時避免產生氣泡
7.實驗室常見的水的種類
(1)、蒸餾水
實驗室最常用的一種純水,雖設備便宜,但極其耗能和費水且速度慢,應用會逐漸減少。蒸餾水能去除自來水內大部分的污染物,但揮發性的雜質無法去除,如二氧化碳、氨、二氧化硅以及一些有機物。新鮮的蒸餾水是無菌的,但儲存后細菌易繁殖;此外,儲存的容器也很講究,若是非惰性的物質,離子和容器的塑形物質會析出造成二次污染。
(2)、去離子水
應用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子,但水中仍然存在可溶性的有機物,可以污染離子交換柱從而降低其功效,去離子水存放后也容易引起細菌的繁殖。
(3)、反滲水
其生成的原理是水分子在壓力的作用下,通過反滲透膜成為純水,水中的雜質被反滲透膜截留排出。反滲水克服了蒸餾水和去離子水的許多缺點,利用反滲透技術可以有效的去除水中的溶解鹽、膠體,細菌、病毒、細菌內毒素和大部分有機物等雜質,但不同廠家生產的反滲透膜對反滲水的質量影響很大。
(4)、超純水
其標準是水電阻率為18.2MΩ-cm。但超純水在TOC、細菌、內毒素等指標方面并不相同,要根據實驗的要求來確定,如細胞培養則對細菌和內毒素有要求,而HPLC則要求TOC低。
8.評價水質的常用指標
(1)、電阻率:
衡量實驗室用水導電性能的指標,單位為MΩ-cm,隨著水內無機離子的減少電阻加大則數值逐漸變大,實驗室超純水的標準:電阻率為18.2MΩ-cm。
(2)、總有機碳:
水中碳的的濃度,反映水中氧化的有機化合物的含量,單位為ppm或ppb。
(3)、內毒素:
革蘭氏陰性細菌的脂多糖細胞壁碎片,又稱之為“熱原”,單位cuf/ml。



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