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滴定分析方法的開發驗證
2023-04-02昀冠科學商城新聞編輯
對滴定分析方法的開發和驗證的經驗總結。
高中時學過四大滴定：酸堿滴定法、絡合滴定法、氧化還原滴定法、沉淀滴定法。滴定法的優點是操作簡單，準確度高，重復性好，能定量分析，對儀器的要求不高，便于推廣。缺點是在藥物分析這塊來講，不如液相和氣相一樣能夠很直觀的進行審計追蹤，不過隨著科技的發展，有些能夠實行審計追蹤，有些儀器譬如梅特勒自動電位滴定儀（如V30）能自動滴定，配備自動的小型打印機，能即時記錄消耗滴定液的體積，現在很多藥廠或者研發機構的電子天平也都配備小型打印機，或者進一步來講的話，錄像也是一個可以審計追蹤的方法，不過錄像的普及還是需要一個很長的道路要走。
一：分析方法的開發：
首先我們需要進行文獻調研，對文獻方法的一個重復，但是也不一定得完全采用文獻的方法，需要根據自己項目的實際情況進行對比優化。又或者文獻資料并不是我們所要的資料，譬如做的項目是復方聚乙二醇電解質散（兒童型），但是目前國內外沒有查到相關的分析方面的文獻，但是查到了復方聚乙二醇電解質散（Ⅱ）和復方聚乙二醇電解質散（Ⅲ）的參考文獻，雖然處方組成及配比不同，但是有些處方種類是近似的，因此就需要根據文獻對比檢測方法，然后進行優化。
1：滴定管的選擇
消耗滴定液消耗的體積及滴定管的選擇是很重要的指標，為什么我們選定的分析需要消耗滴定液最低8ml起步：
這個通過一個簡單的換算就可以知道：藥典上1毫升相當于20滴，一滴也就是0.05ml。我們按照半滴0.02毫升計算。咱們來看消耗半滴的量的檢測的誤差
滴定法誤差計算：
從結果來看，滴定體積越大，重復性及準確就越高，檢測誤差越小。
2：滴定劑的濃度的選擇
我們是做藥物分析的，一般我選擇中國藥典上收載的滴定劑濃度，不進行調整或更改，這樣保證滴定液的使用有來源。譬如鹽酸滴定液，藥典上有如下滴定液的配置（1mol/L、0.5mol/L、0.2mol/L、0.1mol/L），并且藥典上也明確說，如果需要鹽酸滴定液（0.05mol/L、0.02mol/L、0.01mol/L）時，可取鹽酸滴定液（1mol/L或0.1mol/L）加水稀釋制成。必要時標定濃度。假如由于滴定劑的濃度的選擇，導致消耗的體積不是我們需要的體積時，簡單來講，以上藥典上收載的滴定液的濃度依然達不到我想要的結果，就可以調整樣品的稱量，也可以調整移液的體積增加或者減少檢測樣品的濃度，以與滴定液的消耗體積進行匹配。
二、分析方法的驗證
分析方法確定后，需要進行分析方法的驗證。
1、首先做專屬性試驗，專屬試驗的目的，是為了證明空白溶劑或者輔料等不干擾樣品的測定，或者干擾了不得過2.0%。如果是對于原料的檢測的話， 其中空白是在不加樣品的情況下，按照同法進行操作所得的結果。制劑的空白指的是除了被測成分，其他全是全輔料，以3個不同劑型案例，告訴大家不同的樣品，怎樣做專屬試驗。
2、線性試驗：應該在設計的范圍內測定線下關系，一般液相或氣相的線性可以用同一貯備液逐步稀釋，也可以分別稱取對照品，制備一系列的濃度，是要求至少制備5份不同濃度水平，進行線性回歸，但是容量法的線性，《歐洲藥典質量標準的起草技術指南》2005年版，明確提出對至少7份不同重量的供試品進行滴定。滴定終點消耗的滴定液體積應為所用滴定管體積的20~90%。
通過線性回歸方程對依賴于供試品重量（m）的滴定終點體積（v）進行評價，獲得線性回歸方程并用斜率進行表示（bobs），通過與理論（給定的滴定常數）斜率（btheor）之間的偏差進行判斷。
對于電位滴定法，測定的值與理論值的相對偏差不得過0.3%，采用指示劑法，相對偏差不得過0.5%。
3、準確度：分別配制濃度為80%、100%和120%（如制劑需要測定含量均勻度，應為測試濃度的70%、100%和130%）的供試品溶液各3份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。這個要求和液相或者氣相的要求是一致的，但是這里需要強調一點的是，我們常規的方法一般是稱取一定的固體標準品和全輔料，同含量的配制方法進行回收試驗，但是有的比較特殊，譬如，鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液項目，稱取氯化鈉對照品和鹽酸莫西沙星對照品置量瓶中，由于同離子效應，導致鹽酸莫西沙星原料不能完全溶解，因此需要模仿制劑工藝，先將鹽酸莫西沙星溶解，然后加入氯化鈉溶液的方式進行回收試驗，因此具體的項目需要根據具體情況具體分析。
4、重復性：制劑中含量的重復性和液相及氣相色譜一樣，通過平行配制6份樣品，所得含量的結果的RSD進行驗證，這個就不需要過多解釋。
5、溶液穩定性考察：關于容量法溶液穩定性考察，一般不需要做，因為對于操作簡單，反應靈敏的滴定法，配置完樣品一般也都很快測了，不會放置太長時間。除非有特別情況。
滬公網安備31011502401370
