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ELISA試劑盒檢測原理
2021-05-26昀冠科學(xué)商城新聞編輯
ELISA試劑盒檢測原理
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
ELISA生物檢測方法具有敏感度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好等優(yōu)點。ELISA生物檢測試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
ELISA的基本原理有三條：
（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。
目前市面上的ELISA試劑盒檢測原理主要有以下四種：直接法，間接法，夾心法，競爭法。
ELISA試劑盒評價標(biāo)準(zhǔn)：
① 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，應(yīng)大于等于0.9900。
② 靈敏度：反應(yīng)試劑盒的最低檢測濃度
③ 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
④ 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)
⑤ 回收率：判斷實驗的準(zhǔn)確性和特異性
ELISA試劑盒液體類標(biāo)本:包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培育上清等。昀冠科學(xué)商城友情提醒：ELISA試劑盒在搜集樣本前需要有一個完好的方案，確定檢測的成份是否穩(wěn)定。
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